产品信息

名称KHM-5M (人甲状腺癌细胞(未分化)) (STR鉴定正确)

别称KHM/5M; KHM5M

种属人类

年龄（性别）男性，65岁

组织来源甲状腺未分化(间变性)癌；转移部位:胸腔积液

生长特性贴壁细胞

细胞形态成纤维细胞样

生物安全等级1

推荐传代比例1:3-1:6

推荐换液频率2~3次/周

倍增时间~27小时(JCRB)

冻存条件

冻存液：55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO

温度：液氮

培养条件

气相：空气，95%；CO2，5%

温度：37℃

保藏机构JCRB; JCRB0148

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　　KHM-5M人甲状腺癌细胞传代操作步骤：

　　一、贴壁细胞传代

　　1.提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热，用75%酒精擦拭后再放入超净台内。

　　2.吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液，加少量PBS润洗细胞。

　　3.加入适量胰酶，使胰酶的量能盖住细胞，37℃孵育，每隔2~3min显微镜下观察，待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶，加入新鲜培养基，晃动细胞瓶，终止胰酶作用。

　　4.KHM-5M人甲状腺癌细胞KHM-5M用吸管小心吹打贴壁的细胞，制成细胞悬液。控制吹打的力度，避免产生大量的气泡。

　　5.将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内，加入新鲜培养基，置37℃温箱培养，隔天观察贴壁生长情况。

　　二、悬浮细胞传代

　　1.将细胞悬液转移到无菌离心管内，1000rpm离心5min。

　　2.弃去上清，加入新鲜的培养基，用吸管小心吹散沉淀，制成细胞悬液。

　　3.将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内，加入新鲜培养基，置37℃温箱培养。